1. 열변성 곡선

Figure 4는 온도 변화에 따른 Calf thymus DNA의 열변성 곡선을 보여주며, 약 70 ℃부근에서 흡광도의 급격한 변화를 나타낸다. Table 1은 260 nm 에서 각 온도에서 측정한 흡광도의 결과를 보여준다.

2. Tm과 %G-C Content의 계산 방법

Figure 4. 온도 변화에 따른 Calf thymus DNA의 열변성 곡선
(Peltier Single Cell Holder)

Table 1. 온도에 따른 흡광도 값 (260 nm, Peltier Single Cell Holder)

3. Tm 과 % G-C

실험 결과
Tm = 69 ℃
%G-C = 42.2%
(Reported value = 42 %)

Figure 5. 온도 변화에 따른 Calf thymus DNA의
열변성 곡선 (Peltier Multi-Cell Holder)

이 실험에서는 Calf thymus DNA 의 열변성을 관찰하였다. PDA UV-Vis Spectrophotometer S-3100과 Peltier Temperature Controller를 이용하여 Tm이 69 ℃임을 측정하였고, 이 결과로 % G-C가 문헌값인 42 %에 근접한 42.2%의 결과를 신속하고 정확하게 얻을 수 있었다. 또한 Peltier Multi-Cell Holder를 이용하여 한 번에 최대 8개까지의 데이터를 재현성 있게 획득할 수 있음을 보였다..(Figure 5). 그리고 LabPro ® Plus Bio Package 의 Denaturation method를 통해 Tm 과 % G-C 함량을 쉽고 빠르게 얻을 수 있었다.

1. Aposhian, H.V. and Kornberg, A., J. Biol. Chem. 237, 519 (1962)
2. Marmur, J., et al.,+ J. Mol. Biol. 5, 109 (1962)