Wave Scan mode를 이용하여 측정한 donor, acceptor 시료의 흡수, 방출 스펙트럼은 그림 4 (a), (b)와 같다. 다음으로 donor의 방출 스펙트럼과 acceptor의 흡수 스펙트럼의 유사성을 확인 하기 위해 그림 4 (c)와 같이 두 그래프를 병합시켰다. 병합된 스펙트럼은 매우 넓은 영역이 중첩되고, FRET을 발생시키기 충분한 조건을 가지고 있음을 확인 할 수 있다.

그림 4. Donor 시료 (a)와 acceptor 시료 (b)의 스펙트럼과
두 시료의 병합 스펙트럼 (c)

마지막으로 FRET 현상을 스펙트럼 상에서 확인하였다. 그림 5와 같이 혼합 이전에는 donor가 acceptor에 비해 큰 차이를 보이며 형광을 크게 내는데, 두 시료를 혼합시키면 에너지 공명 전달에 의하여 donor의 형광이 작아지고, acceptor의 형광이 커져 세기의 비가 역전됨을 확인 할 수 있다.

그림 5. FRET 전후에 따른 형광 세기 변화

본 연구에서는 ㈜신코의 형광 분광광도계 FS-2와 FluoroMaster Plus의 Wave Scan Mode를 이용하여 형광 프로브가 부착된 oligonucleotide의 흡광, 발광 스펙트럼과 FRET의 발생 전제 조건들을 확인하였다. 또한 donor와 acceptor의 형광 세기 변화를 추적하여FRET 현상에 의한 에너지 전달도 직접 확인 할 수 있었다.

본 연구에서는 ㈜신코의 형광 분광광도계 FS-2와 FluoroMaster Plus의 Wave Scan Mode를 이용하여 형광 프로브가 부착된 oligonucleotide의 흡광, 발광 스펙트럼과 FRET의 발생 전제 조건들을 확인하였다. 또한 donor와 acceptor의 형광 세기 변화를 추적하여FRET 현상에 의한 에너지 전달도 직접 확인 할 수 있었다.

1. Forster T., Ann. Physik, 437, 55 (1948).
2. Rudiger Rudolf, et al., Nature Reviews Molecullar Cell Biology, 4, 579 (2003).
3. Brian A Pollok, Rogger Heim, Trend in cell biology, 9, 57 (1999).